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線粒體活體染色及觀察

線粒體活體染色及觀察

小白鼠肝細胞線粒體的超活染色及觀察

一、 實驗目的

掌握動物細胞活體染色的原理和相關的技術。

二、 實驗原理

活體染色是指對生活有機體的細胞或組織著色但又無害的一種染色法。它的目的是顯示生活細胞內某些結構,而不影響細胞的生命活動和產生任何物理、化學變化以致引起細胞的死亡。

詹納斯綠B(Janus green B)是毒性較小的堿性染料,可專一的對線粒體進行超活染色,這是由于線粒體內的細胞色素氧化酶系的作用,使染料始終保持氧化狀態(即有色狀態),呈藍綠色;而線粒體周圍的細胞質中,這些染料被還原為無色的色基(即無色狀態)。

三、 實驗用品

1. 材料:

小白鼠肝臟

2. 試劑:

Ringer溶液:NaCl 0.85g + KCl 0.25g + CaCl2 0.03g + 蒸餾水100ml 1%、1/5000詹納斯綠B溶液:稱取50mg詹納斯綠B溶于5ml Ringer溶液中,30-40℃加熱,使之溶解,用濾紙過濾后,即為1%原液。取1%原液1ml加入49ml Ringer溶液,即為1/5000工作液裝入棕色瓶中備用。

3. 器材:

顯微鏡、解剖盤、剪刀、吸管、載玻片、蓋玻片、擦鏡紙

四、 實驗步驟

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